四極桿液質用 Trap-Free 2維LCMS系統(tǒng)

Question :

使用LCMS測定以不揮發(fā)性流動相條件測出的雜質時,，是否還需要重新探討揮發(fā)性流動相條件？

Solution :

不需要,。如果使用Trap-free 2維LC/MS系統(tǒng)則可在線變更流動相,。

可在線實現(xiàn)不揮發(fā)性流動相和揮發(fā)性流動相之間的切換,。
與Labsolutions聯(lián)合使用，是非常便利的支持工具,。
只須將目標雜質導入MS,，而無需擔心峰遺失。

雜質鑒定系統(tǒng)的分析流程

使用支持工具創(chuàng)建時間程序和批處理表

只需輸入在一維UV色譜圖上的雜質峰的保留時間,，就可編制的閥切換,。同時創(chuàng)建用于獲取多個雜質與各空白數(shù)據(jù)的批處理表。

使用支持工具制作時間程序與批處理表

有力支持雜質解析的軟件

利用作為LabSolutions附屬功能的數(shù)據(jù)瀏覽器,，比較樣品與空白的數(shù)據(jù),，可方便地確認雜質的質譜圖。      

數(shù)據(jù)瀏覽器上顯示樣品與空白數(shù)據(jù)的實例

（相關信息）基于Trap-Free 2維LC/MS雜質鑒定系統(tǒng)的藥物雜質分析

注意事項
1.本系統(tǒng)由LC單元,、質譜儀,、及啟動套件構成。
2.啟動套件包括軟件和一套必要的配管部件,。

四極桿液質用 Trap-Free 2維LCMS系統(tǒng)雜質鑒定系統(tǒng)的藥物雜質分析

    為了提高藥物的安全性,，需要解析藥物中所含雜質有無遺傳毒性等嚴重毒性,，這就要求進行結構解析。LC/MS可有效應用于微量雜質的結構解析,，但HPLC分析雜質時,，經(jīng)常以210nm等短波長檢測,，因此,，流動相多使用磷酸緩沖液,。此時，不能以此流動相將未知雜質導入LC/MS,。有時即便緩沖液的pH*,，但因一些雜質的分離狀態(tài)發(fā)生變化，而難以使用LC/MS進行未知雜質的解析,。

    圖1為阿托伐他汀鈣的雜質分析,，是將流動相緩沖液從日本藥典收錄的檸檬酸緩沖液 pH5.0（為不揮發(fā)性鹽，不能導入LC/MS）變更為同一pH的醋酸緩沖液,，將有機溶劑從四氫呋喃/ 乙腈（1/1）混合液變?yōu)橐译鏁r的色譜圖?？芍鞒煞值南疵摃r間雖然沒有大的差異,，但雜質的洗脫模式發(fā)生了較大變化。因此,，為了解析雜質的結構解析,，需要以HPLC分析條件下的流動相，將目的雜質導入LC/MS,。

    在此介紹應用“Trap-free 2維LC/MS雜質鑒定系統(tǒng)”（圖2）進行上述雜質結構解析的實例,。

圖1　 阿托伐他汀鈣の雜質分析例

    在此系統(tǒng)的1維中,，以通常的HPLC分析條件進行分離，將需要進行結構解析的雜質峰的峰頂附近導入捕集環(huán)路,。此環(huán)路對于2維的分離起到進樣器的作用,。2維起到分離1維的流動相成分和目的雜質，以及導入至LC/MS的作用,。

    因此,， 2維的分離條件幾乎不進行單獨探討，使用一般的基于0.1％甲酸/ 乙腈的梯度洗脫導入MS部分,。為了進行結構解析,，MS使用可實施、獲得的精密質量數(shù)的LCMS-IT-TOF,。

圖2　Trap-free2維LC/MS雜質鑒定系統(tǒng)配置
［1維（紅色流路）在通常的分析條件下使用］

    圖3表示按日本藥典收錄的分離條件檢測的雜質a（含約0.2％,，參照圖1）的2維的色譜圖。沒有進行捕集濃縮,，將峰頂附近導入2維,，去除了來自1維流動相的影響，可將目的雜質導入MS,。圖4表示對此雜質獲得的MS譜圖,。

    可同時進行正負離子測定，可測定質量數(shù)信息,。

圖3　雜質a的2維色譜圖

圖4　雜質a的MS譜圖

    雜質a的m/z 718的MS/MS譜圖結果如圖5所示,。將本譜圖與主成分阿托伐他汀的MS/MS譜圖進行比較，推測雜質a的結構為圖6,。并且,，對于更微量的雜質b（約0.01％，參照圖1）,，如圖7所示,，能夠以出色的S/N比獲得正、負極性的質譜圖,。

圖5　雜質a的MS/MS譜圖

圖6　雜質a的推測結構

圖7 雜質b的MS譜圖